Il test di fragilità osmotica valuta la resistenza dei globuli rossi alla lisi in soluzioni ipotoniche. I globuli rossi normali resistono a un certo grado di ipotonicità grazie al rapporto superficie/volume della membrana. Nella sferocitosi ereditaria, i globuli rossi hanno forma sferica con ridotto rapporto superficie/volume e quindi fragilità osmotica aumentata (emolizzano a concentrazioni saline più alte del normale). Nell'anemia falciforme e nelle talassemie (cellule bersaglio), la fragilità è ridotta. Il test è utile nella diagnosi della sferocitosi ereditaria.

Non è richiesta preparazione particolare. Campione fresco, analizzare entro poche ore.

Emolisi iniziale: NaCl 0.45-0.50%. Emolisi completa: NaCl 0.30-0.35%. La curva di fragilità osmotica normale mostra emolisi progressiva alle concentrazioni saline decrescenti.

Fragilità osmotica aumentata (emolisi a concentrazioni NaCl più alte): sferocitosi ereditaria (diagnosi principale), altre anemie emolitiche con sferociti (autoimmune). Fragilità osmotica ridotta (resistenza aumentata): talassemie, anemia falciforme, deficit di ferro severo (emazie ipocromiche), epatopatie con target cells. Il test può essere eseguito prima e dopo incubazione a 37°C per 24 ore, che accentua le differenze.

Fragilità aumentata indica presenza di sferociti o cellule con membrana alterata (più facilmente lisabili).

Fragilità ridotta indica cellule con aumentato rapporto superficie/volume (cellule bersaglio, emazie ipocromiche).

Il test di fragilità osmotica è indicato nel sospetto di sferocitosi ereditaria: anemia emolitica cronica con sferociti allo striscio, storia familiare positiva, splenomegalia, litiasi biliare in giovane età, ittero neonatale prolungato. La diagnosi di sferocitosi può essere confermata con test più moderni (EMA-binding test in citofluorimetria). La splenectomia è curativa nella sferocitosi severa.